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防病技水
預(yù)防就是利用人工方法增強生物體的自身能力以到預(yù)防疾病發(fā)生的目的。人工是將人工制成的生物制品(如、菌苗、類毒素或細胞制劑等)接種到魚體,使魚體自身產(chǎn)生對相應(yīng)疾病的防御能力。水產(chǎn)上使用的生物制品主要為。
按其性質(zhì)與成分分為單價苗、多價苗和聯(lián)苗;按針對病原種類分為病毒、菌苗、寄生蟲苗。根據(jù)制備方法可分為活、滅活、代謝產(chǎn)物和亞單位及生物技術(shù)苗。其中生物技術(shù)包括基因工程亞單位、合成肽、抗特型抗體、基因工程活載體及DNA。
一、病毒病防病技術(shù) 1.草魚病
草魚病是由草魚病病毒(grass carp hemorrhage vi- rus,GCV)引起的、嚴(yán)重危害草魚養(yǎng)殖的傳染性疫病。
?。?)常用種類 我國在草魚病方面的魚苗主要有以下三類。
①組織 在草魚病病原體尚未有明確定論時,養(yǎng)殖生產(chǎn)上已開始使用組織防控草魚病,制備方法如下∶取典型患病癥狀的魚體肝、脾、腎和肌肉組織,無菌生理鹽水沖洗后,加入生理鹽水或磷酸緩沖液(PBS)制成1∶10勻漿液,離心取上清液,分別加入800單位/毫升青霉素和800微克/毫升鏈霉素及0.1%福爾馬林,56℃滅活2小時或32℃滅活72小時,4~8℃可保存半年以上。使用方法∶肌內(nèi)或腹腔注射,保護率可達 70%以上。
組織的制備技術(shù)和工藝比較簡單,對設(shè)備要求不高,極易被各級水產(chǎn)技術(shù)單位掌握,因此推廣和應(yīng)用迅速。而且組織價格低廉、效果較好,受到廣大養(yǎng)殖者的喜愛,尤其與腸炎病、爛鰓病和草魚赤皮病一起制備的組織實際上成為了一種多聯(lián),在生產(chǎn)中表現(xiàn)出穩(wěn)定的防控效果。
?、诩毎ㄟ^把病毒接種到細胞中,病毒繁殖出現(xiàn)病變后收獲病毒再滅活制成的。我國已建立了ZC-7901、CIK、 PSF 等草魚敏感細胞株,并掌握了其工廠化培養(yǎng)技術(shù),為草魚病細胞提供了強大的基礎(chǔ)。草魚病病毒大規(guī)模培養(yǎng)方法主要有兩種∶一種是采用微載體大規(guī)模培養(yǎng)細胞,即將細胞吸附在 GT-2微載體上,再將微載體懸浮培養(yǎng),單位體積培養(yǎng)液的細胞培
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效率比靜置培養(yǎng)高 20~25倍,病毒滴度可提高45倍左右,但用于微載體細胞培養(yǎng)的生物反應(yīng)器需要有全面的培養(yǎng)參數(shù)、氣體控制設(shè)施,價格較為昂貴;另一種是采用旋轉(zhuǎn)管進行細胞培養(yǎng),WC21- 891旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)機可容納3000毫升的血清瓶21個,單位培養(yǎng)液的細胞產(chǎn)量比靜置培養(yǎng)高3.5~5倍,該裝置及相應(yīng)培養(yǎng)室要求較之生物反應(yīng)器低廉,比較適合一般的實驗室進行制備。
?、廴醵净钪苽浞椒ā脤⒉《局杲臃N于PSF細胞,于培養(yǎng)液中加人1∶1000濃度病毒液,29代后獲得性狀穩(wěn)定的減毒株GCHV-892株,去除培養(yǎng)液,其減毒效果保持穩(wěn)定不變。減毒株對草魚沒有致病力,但有較好的原性。目前,弱毒活已在廣東、廣西、福建、海南、湖北、湖南、四川、浙江、江蘇等多個地區(qū)進行了區(qū)域性試驗,保護率高達90%以上。
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