本試劑盒只能用于科學研究，不得用于醫(yī)學診斷
雞阻抑素(PHB)ELISA試劑盒 免費代測
使用說明書
檢測原理
試劑盒采用雙一步夾心法酶聯吸附試驗（ELISA）。往預先包被白蛋白（ALB）的包被微孔中，依次加入標本、品、HRP標記的檢測，經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的。顏色的深淺和樣品中的白蛋白（ALB）呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。
雙夾心ELISA：此法與雙夾心ELISA的主要區(qū)別在于：它是采用酶標抗檢查多種大分子抗原，它不僅不必標記每一種，還可試驗的性。此法的基本程序為：① 加（Ab-1）包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干② 加待檢抗原（Ag） → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干③ 加用非同種動物生產的特（Ab-2)→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干④ 加入酶標抗Ab-2（AB-3）→ 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干⑤ 加底物液 → 37℃ 20分鐘，加終止液⑥ 用ELISA檢測儀測定OD值。
布ELISA：（C－ELISA） C－ELISA（Cloth-ELISA）是加拿大學者Blais,B. W.等于1989年建立的一種新型檢測技術。該是以疏水性聚脂布（Hydrophobic Polyester Cloth）即滌綸布為固相載體，這種大孔徑的的疏水布具有吸附樣品量大，可為反應提供較大的表面積，反應的性，且容易洗滌，不需特殊儀器等優(yōu)點。其基本原理與Dot-ELISA類似，只是載體不同。以對布氏桿菌抗原的檢測為例，C－ELISA的主要程序為：⑴ 把抗布氏桿菌的包被（吸附）在聚脂布上，并經洗滌及封閉；⑵ 加被檢樣品并于室溫下感作30分鐘，然后洗5次；⑶ 加酶標記的抗布氏桿菌，于室溫下感作30分鐘，然后洗滌5次；⑷ 加入底物液顯色；⑸ 測定OD值。
樣品收集、處理及保存
1. ：使用不含熱原和內的試管，操作中避免任何細胞，收集血液后，3000轉離心10分鐘將和紅細胞迅速小心地分離。
2. ：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鐘取上清。
3. 細胞上清液：3000轉離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4. 組織勻漿：將組織加入適量鹽水搗碎。3000轉離心10分鐘取上清。
5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
自備物品
1. 酶標儀（450nm）
2. 加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒溫箱
布ELISA：（C－ELISA） C－ELISA（Cloth-ELISA）是加拿大學者Blais,B. W.等于1989年建立的一種新型檢測技術。該是以疏水性聚脂布（Hydrophobic Polyester Cloth）即滌綸布為固相載體，這種大孔徑的的疏水布具有吸附樣品量大，可為反應提供較大的表面積，反應的性，且容易洗滌，不需特殊儀器等優(yōu)點。其基本原理與Dot-ELISA類似，只是載體不同。以對布氏桿菌抗原的檢測為例，C－ELISA的主要程序為：⑴ 把抗布氏桿菌的包被（吸附）在聚脂布上，并經洗滌及封閉；⑵ 加被檢樣品并于室溫下感作30分鐘，然后洗5次；⑶ 加酶標記的抗布氏桿菌，于室溫下感作30分鐘，然后洗滌5次；⑷ 加入底物液顯色；⑸ 測定OD值。
操作注意事項
1. 試劑盒保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶，這屬于正?，F象，水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保存。
3. 濃度為0的S0號品即可視為陰性對照或者空白；按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍，終結果乘以5才是樣本實際濃度。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有組分使用前充分搖勻。
試劑的
20×洗滌緩沖液的稀釋：蒸餾水按1：20稀釋，即1份的20×洗滌緩沖液加19份的蒸餾水。
洗板
1. 手工洗板：甩盡孔內，每孔加滿洗滌液，靜置1min后甩盡孔內，在吸水紙上拍干，如此洗板5次。
2. 自動洗板機：每孔注入洗液350μL，浸泡1min，洗板5次。
操作步驟
1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。
2. 設置品孔和樣本孔，品孔各加不同濃度的品50μL；
3. 樣本孔先加待測樣本10μL，再加樣本稀釋液40μL；空白孔不加。
4. 除空白孔外，品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標記的檢測100μL，用封板膜封住反應孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。
5. 棄去，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液，靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復洗板5次（也可用洗板機洗板）。
6. 每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入終止液50μL，15min內，在450nm波長處測定各孔的OD值。
結果判斷
繪制曲線：在Excel工作表中，以品濃度作橫坐標，對應OD值作縱坐標，繪制出品線性回歸曲線，按曲線方程計算各樣本濃度值。
ELISA：本法主要用于檢測型特。該現已成為豬傳染性胃腸炎（TGE）、豬偽（PR）及豬胸膜肺炎（AP）的主要檢測。下面以AP2型的ELISA檢測法為例介紹其操作程序：① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃過夜，洗滌三次、拋干② 用200μl緩沖液進行封閉 → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干③ 加工作量1:4稀釋被檢豬100μl → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干④ 加100μl工作量兔抗AP2型 → 37℃ 30分鐘，洗滌三次、拋干⑤ 加100μl工作量豬抗兔IgG-HRP → 37℃ 60分鐘，洗滌三次、拋干⑥ 加100μl OPD底物液 → 37℃ 20分鐘，加終止液⑦ 用ELISA檢測儀測定OD值。本試驗同時設陰、陽性對照、兔抗AP2型陽性對照、空白對照。
試劑盒性能
1. 準確性：品線性回歸與預期濃度相關系數R值，大于等于0.9900。
2. 靈敏度檢測濃度小于1.0 mg/mL。
3. 特：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4. 重復性：板內、板間變異系數均小于15%。
5. 貯藏：2-8℃，避光防潮保存。
6. 有效期：6個月
免責聲明
1. 試劑盒僅供研究使用，不得用于臨床實驗或人體實驗，否則所產生的一切后果，由實驗者承擔，本公司概不負責。
2. 嚴格按照說明書操作，實驗者違反說明書操作，后果由實驗者承擔。
主營產品: ELISA試劑盒,ELISA檢測試劑盒,標準品,生化試劑
上海篤瑪生物科技有限公司是一家從事生物學試劑及試劑盒的生物企業(yè)。 總部位于上海，并在全國設有經銷或代理機構。產品因可靠而穩(wěn)定的質量和較為完善的售后服務確立了“篤瑪生物”良好的品牌形象。公司秉承“以客戶為中心、以產品為保障、以誠信為基礎、以創(chuàng)新為宗旨”的發(fā)展理念，擁有的研發(fā)和質量檢測團隊以及的倉儲和物流系統(tǒng)?！昂V瑪生物”已經得到全國科研工作者的認可，成為廣大經銷商推崇的品牌。 公司擁有一批的研發(fā)人員，我們專注于生物產品的不斷完善和創(chuàng)新。產品覆蓋面廣，品質可靠。先后開發(fā)了涵蓋分子生物學、細胞生物學、學、生物醫(yī)學等領域的多種試劑及試劑盒。同時，提供各種常規(guī)生化試劑，庫存常備產品多達10000多種，可隨時為廣大科研工作者提供各類試劑。在質量方面，謹記公司信念：質量一切。所有研發(fā)的產品都設有嚴謹的生產流程，科學的質量檢測方法和成熟的質量檢測程序，我們恪守對每一位用戶的承諾：用的態(tài)度做的品牌。同時，公司組建了一支的技術服務隊伍，能夠為科研工作者提供的技術服務。每一位購買篤瑪生物產品的用戶都能夠得到的咨詢和完善的售后服務。
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