產(chǎn)品介紹：
產(chǎn)品名稱：牛皮蠅蛆探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Hypoderma bovis
產(chǎn)品貨號：LZ-P3696
規(guī)格：50T
分類：PCR檢測試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運輸：低溫、避光。
有效期：一年
如何進(jìn)行 PCR 實驗？
一、準(zhǔn)備實驗材料（1）DNA模板：包含你想要復(fù)制的DNA區(qū)域。上海（2）引物：短的單鏈DNA片段，用于指導(dǎo)DNA合成的起始位置。（3）DNA聚合酶：一種酶，用于合成DNA。（4）四種脫氧核苷酸（dNTPs）：DNA的構(gòu)建塊。（5）緩沖液：提供適宜的反應(yīng)環(huán)境。（6）鎂離子或其它必需的離子：通常作為DNA聚合酶的輔助因子。二、設(shè)定反應(yīng)混合物將所有材料混合在微量離心管中?；旌衔锏目傮w積通常在20-50微升之間。
3. PCR程序（1）將混合物放入PCR機(jī)（熱循環(huán)儀）中，并設(shè)定程序。PCR程序通常包括以下階段：（2）初次變性：加熱至94-98°C，持續(xù)幾分鐘，使DNA雙鏈解開成單鏈。（3）循環(huán)步驟（通常進(jìn)行30-40次循環(huán)）：（4）變性階段：加熱至94-98°C，持續(xù)20-30秒，使DNA雙鏈解開。（5）退火階段：降溫至50-65°C，持續(xù)20-40秒，允許引物與模板DNA結(jié)合。（6）延伸階段：加熱至72°C，持續(xù)1分鐘每1千個堿基，以便DNA聚合酶合成新的DNA鏈。（7）后延伸：在72°C下持續(xù)5-10分鐘，確保所有可用的DNA模板都被復(fù)制。（8）保持階段：將溫度降至4-15°C，直到用戶準(zhǔn)備取出樣品。
PCR實驗的基本步驟：
DNA聚合酶是實驗室中常用的生物學(xué)酶之一，在PCR實驗中具有重要的作用。實驗室常用的DNA聚合酶，包括Taq聚合酶、Pfu聚合酶和Tth聚合酶。
一、·Taq聚合酶：
Taq聚合酶是由Thermus aquaticus細(xì)菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶，在分子生物學(xué)研究中得到廣泛應(yīng)用。Taq聚合酶具有熱穩(wěn)定性，可以在高溫條件下保持活性，這是由于其來源于熱液生物，能夠存活和正?；顒佑诟邷丨h(huán)境。這使得Taq聚合酶在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）中起到關(guān)鍵的作用。Taq聚合酶能夠按照DNA模板合成新的DNA鏈，因此在PCR中用于擴(kuò)增目標(biāo)DNA片段。然而，Taq聚合酶缺乏3'-5'外切酶活性，導(dǎo)致其生成的PCR產(chǎn)物末端容易出現(xiàn)額外的腺嘌呤堿基。因此，在某些應(yīng)用中，需要使用具有外切酶活性的聚合酶。
二、Pfu聚合酶：
Pfu聚合酶是由Pyrococcus furiosus細(xì)菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶。與Taq聚合酶相比，Pfu聚合酶具有更高的熱穩(wěn)定性和耐酶性。這使得Pfu聚合酶在高溫PCR反應(yīng)中表現(xiàn)出色，其高度穩(wěn)定的酶活性能夠確保PCR反應(yīng)的可靠性和準(zhǔn)確性。此外，Pfu聚合酶還具有3'-5'外切酶活性，可以修復(fù)并糾正PCR反應(yīng)中的腺嘌呤堿基誤配，有效防止誤差累積。因此，Pfu聚合酶適用于需要高度準(zhǔn)確的PCR擴(kuò)增和DNA測序。
三牛皮蠅蛆PCR、Tth聚合酶：
Tth聚合酶是由Thermus thermophilus HB8細(xì)菌產(chǎn)生的一種DNA聚合酶。與Taq聚合酶和Pfu聚合酶不同，Tth聚合酶具有熱活性反轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄酶活性，可以將RNA模板合成相應(yīng)的DNA鏈。因此，Tth聚合酶在逆轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR）中得到廣泛應(yīng)用，用于將RNA轉(zhuǎn)錄成DNA，并通過增加熱活性酶來實現(xiàn)PCR擴(kuò)增。此外，Tth聚合酶還具有一定的外切酶活性，可用于修復(fù)和校正PCR產(chǎn)物的末端。
實驗步驟：
一．牛皮蠅蛆試劑樣品制備
1．PCR擴(kuò)增并檢測。根據(jù)不同的引物挑選適合的退火溫度進(jìn)行PCR擴(kuò)增。擴(kuò)增產(chǎn)物用2-2.5%的瓊脂糖膠跑水平電泳檢測，上樣量3-5ul。PCR產(chǎn)物為10ng/nl左右為佳。
2．PCR產(chǎn)物與變性buffer混合。在干凈的PCR管底部加入5ul SSCP上樣緩沖液（變性緩沖液，同《分子克隆》中的測序緩沖液），然后在緩沖液中央加入PCR擴(kuò)增產(chǎn)物。按照經(jīng)驗，擴(kuò)增效果在瓊脂糖膠上能看出比較亮的帶的樣品加1ul，效果很好加0.5ul，如果不太好就適當(dāng)增加1.5、2或3不等，同時加大上樣緩沖液的量，比如加3ul的PCR產(chǎn)物，緩沖液加到8ul變性效果更好。
3．PCR產(chǎn)物變性。加好的樣品進(jìn)行離心，使樣品集中在管底。PCR儀上95℃變性10分鐘，立即取出PCR產(chǎn)物連同架子一同置于冰上靜置5min，以免變性的產(chǎn)物復(fù)性。
人細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA
豬基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)試劑盒 Pig maix metalloproteinase 2/Gelatinase A,MMP-2 ELISA kit
HumanPlatelet-DerivedGrowthFactorAB,PDGF-ABELISAkit 人血血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)PCR檢測試劑盒
HumanmuscarinicacetylcholinereceptorM3,M-AChRM3PCR檢測試劑盒人受體亞型M3(M-AChRM3)PCR檢測試劑盒
組織誘導(dǎo)型巨噬細(xì)胞合成酶(iNOS/NOS2/mNOS)活性熒光定量檢測試劑盒20次
Humanglialcellline-derivedneuroophicfactor,GDNFELISAKit人膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)PCR檢測試劑盒
人變(MN) ELISA
兔子組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒 Rabbit Tissue-type Plasiminogen Actilyse,t-PA ELISA Kit
絲酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G(Serpina3g)PCR檢測試劑盒 ， Serpina3g ELISA Kit
Mouseβ-Lactamaseinhibitors,BLIPCR檢測試劑盒小鼠β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)PCR檢測試劑盒
GuineapigGrowthhormone,GHPCR檢測試劑盒豚鼠生長激素(GH)PCR檢測試劑盒
Humanai-chorionicgonadoopin-aibody,AhCGAbELISAKit人抗染色體抗體(ai-chromosomeAb)PCR檢測試劑盒
牛皮蠅蛆探針法熒光定量PCR試劑盒phospho-SHC (Tyr349)： 0酸化SH2結(jié)構(gòu)域轉(zhuǎn)化蛋白1抗體 0.1ml
E2EPF： 泛素交聯(lián)酶抗體 0.2ml
CD45(白細(xì)胞共同抗原)抗體 Anti-CD45 0.1ml
Anti-YAP1/FITC 熒光素標(biāo)記原癌基因Yes相關(guān)蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-Glycogen synthase 1(Ser641) 0酸化葡萄糖合成酶1抗體 規(guī)格 0.1ml
CDK1 (Cyclin-Dependent Kinase 1) 周期素依賴性激酶1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
陰溝腸桿菌分離瓊脂(ECIA)
3200元
產(chǎn)品名：陰溝腸桿菌分離瓊脂,培養(yǎng)基
乙酰胺肉湯生化管
3200元
產(chǎn)品名：乙酰胺肉湯生化管,培養(yǎng)基
胰酶細(xì)胞消化液(不含EDTA)
3200元
產(chǎn)品名：胰酶細(xì)胞消化液,培養(yǎng)基
乙酰胺肉湯
3200元
產(chǎn)品名：乙酰胺肉湯,培養(yǎng)基
胰酪胨大豆羊血瓊脂基礎(chǔ)
3200元
產(chǎn)品名：胰酪胨大豆羊血,培養(yǎng)基
胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基(TSB)
3200元
產(chǎn)品名：胰酪胨大豆肉湯培養(yǎng)基,培養(yǎng)基
胰酪胨大豆多粘菌素肉湯
3200元
產(chǎn)品名：胰酪胨大豆多粘菌素,培養(yǎng)基
胰酪大豆胨液體培養(yǎng)基管
3200元
產(chǎn)品名：胰酪大豆胨液體,培養(yǎng)基