Smad 4母親DPP同源物4ELISA試劑盒

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實驗?zāi)康模?/span>

本試劑盒用于測定人血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中Smad 4母親DPP同源物4的含量。

實驗原理：

上海試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)吸附試驗（ELISA）。往預(yù)先包被Smad 4母親DPP同源物4的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中Smad 4母親DPP同源物4呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度

試劑盒組成：

操作步驟：

母親DPP同源物4試劑盒方法一　用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:

1.　包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg／ml。在每個聚板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡稱洗滌，下同)。

2.　加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。

3.　加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小時，洗滌。

4.　加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。

5.　終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M0.05ml。

6.　結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔O·D值，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍，即為陽性。

　　母親DPP同源物4ELISA方法二　用于檢測未知抗體的間接法：　　　

　　用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg／ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。

注意事項：

1.　正式試驗時，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。

2.　在酶聯(lián)ELISA試劑盒中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:

(1)　固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚、聚、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。

　?。?) 包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg／ml等)進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值大而蛋白量少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。

(3)　酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：用直接ELISA檢測試劑盒法進行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。

(4)　酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。

公司正在出售的產(chǎn)品：

FCGR2B Protein Human 重組人 CD32b / FCGR2B 蛋白 (His 標(biāo)簽)

肝細(xì)胞核因子4α抗體

兔β淀粉樣蛋白1-40(Aβ1-40)ELISA檢測試劑盒Rabbitamyloidbetapeptide1-40,Aβ1-40ELISAKit 96T/48T

ANGPTL2/ANG-2 (Angiopoietin-like Protein 2 0.5mgANGPTL2/ANG-2 (Angiopoietin-like Protein 2) 血管位蛋白樣2/血管生成素樣蛋白-2(多肽)

CD27 Protein Human 重組人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

Bak(BCL2 homologous antagonist/killer 0.2mgBak(BCL2 homologous antagonist/killer) Bcl-2同源拮抗劑Bak(多肽)

CSTA Protein Human 重組人 Cystatin A / CSTA 蛋白 (His 標(biāo)簽)

humanAzidothymidine,AZTELISAKit人疊氮胸苷(AZT)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

小鼠抗心1脂抗體IgA(ACA-IgA)試劑盒 Mouse ai-cardiolipin aibody IgA,ACA-IgA ELISA Kit

RatGATAbindingprotein4,GATA4ELISAKit大鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

酶10抗體

CD44 CD44抗原 (多肽抗原 0.5mgCD44 CD44抗原 (多肽抗原)

AMPK Protein Human 重組人 AMPK (G1/B2/A1) Heterotrimer 蛋白

凋亡相關(guān)蛋白TGFb信號抗體

泛素樣蛋白Sumo2抗體

CD133 造血干細(xì)胞抗原CD133 0.5mgCD133 造血干細(xì)胞抗原CD133

犬透明質(zhì)酸酶2(HAase 2)試劑盒 Canine Hyaluronidase 2,HAase 2 ELISA Kit

人纖維連接素相關(guān)抗原(FRA)ELISA 試劑盒 96T/48T

瞬時受體電位離子通道蛋白/M亞家族抗體  Anti-TRPM2  WB IHC-P IHC-F IF  100ul

AuraStain SP鼠/兔IHC試劑盒  進口/國產(chǎn)

化細(xì)胞核因子抗體

小鼠B細(xì)胞瘤因子2(Bcl-2)ELISA檢測試劑盒MouseB-cellleukemia/lymphoma2,Bcl-2ELISAKit 96T/48T

HumanCyclinDependeKinase5,CDK5ELISAKit人周期素依賴性激酶5(CDK5)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Smad 4母親DPP同源物4ELISA試劑盒Epsin2B蛋白抗體