腫瘤壞死因子β試劑盒,即TNF-β試劑盒,是一種用于特異性地高靈敏地定量檢測(cè)多種屬(人、小鼠及大鼠等)的血清、血漿中的TNF-β的含量。
TNF-β/腫瘤壞死因子β試劑盒檢測(cè)靈敏度高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好,采用雙抗體夾心ELISA法(Sandwich ELISA)檢測(cè)樣品中TNF-β的濃度。TNF-β特異的單克隆捕獲抗體已預(yù)包被于酶標(biāo)板上,當(dāng)加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品時(shí),其中的TNF-β會(huì)與捕獲抗體結(jié)合。當(dāng)加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記TNF-β抗體后,辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記TNF-β抗體與TNF-β結(jié)合,形成夾心的復(fù)合物。
后加入顯色劑TMB溶液,固相捕獲的辣根過(guò)氧化物酶就會(huì)催化無(wú)色的顯色劑氧化成藍(lán)色物質(zhì),在加入終止液后呈黃色。通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)450nm處的吸光度值就能實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。TNF-β濃度與A450值呈正比,通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,對(duì)照樣品吸光度值,即可計(jì)算出樣品中TNF-β濃度。
TNF-β/腫瘤壞死因子β試劑盒保存條件:
標(biāo)準(zhǔn)品4℃保存,1-2周內(nèi)有效,-20℃保存6個(gè)月內(nèi)有效,試劑盒其它組分4℃保存6個(gè)月內(nèi)有效。除標(biāo)準(zhǔn)品外,試劑盒其它組分嚴(yán)禁凍存。
TNF-β/腫瘤壞死因子β試劑盒注意事項(xiàng):
1、由于標(biāo)準(zhǔn)品一般是凍干粉,在制備后需要嚴(yán)格校準(zhǔn),所以標(biāo)準(zhǔn)品的瓶數(shù)及每瓶標(biāo)準(zhǔn)品所需加入的稀釋液體積請(qǐng)以實(shí)際收到的試劑盒及標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)簽上的標(biāo)注為準(zhǔn)。
2、洗滌液(20X)在低溫下可能有結(jié)晶,如果發(fā)現(xiàn)有結(jié)晶,請(qǐng)室溫水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再配制工作液。
3、為標(biāo)準(zhǔn)品的性,標(biāo)準(zhǔn)品配制使用后,如果有剩余請(qǐng)勿再次使用。
4、TMB溶液請(qǐng)勿接觸氧化劑和金屬,否則容易失效。
5、加樣時(shí),請(qǐng)注意每個(gè)樣品或標(biāo)準(zhǔn)品更換槍頭,一方面避免交叉污染,另一方面也避免吸取體積的誤差。
6、由于本試劑盒均經(jīng)過(guò)立測(cè)試,所以請(qǐng)勿混用不同貨號(hào)和不同批次的試劑盒組分,即使是同種試劑盒不同批次的試劑盒組分也不能混用。多個(gè)試劑盒同時(shí)檢測(cè)時(shí),請(qǐng)立使用各個(gè)試劑盒中的試劑,請(qǐng)勿使用不同試劑盒中相同名稱的組分。
7、充分混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果的性很重要,在加液后請(qǐng)輕輕晃動(dòng)整個(gè)96孔板,以混勻。
8、本試劑盒很多操作在室溫進(jìn)行,要求嚴(yán)格控制室溫在25-28℃。溫度低于25℃會(huì)導(dǎo)致終檢測(cè)到的吸光度顯著下降。
9、洗滌過(guò)程非常重要,洗滌不充分會(huì)使度下降并導(dǎo)致結(jié)果誤差較大。
10、檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)建議設(shè)置重復(fù)孔,以確保檢測(cè)結(jié)果的可信度。
11、加樣過(guò)程中須避免氣泡的產(chǎn)生。
12、本產(chǎn)品于科研人員的科學(xué)研究用,不得用于臨床診斷或治療,不得存放于普通住宅內(nèi)。
13、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。