線粒體蘋果酸脫氫酶（MDHm）試劑盒微量法說明書

微量法 100管/96樣    

正式測定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測定

商品屬性：

產(chǎn)品名稱：線粒體蘋果酸脫氫酶（MDHm）試劑盒微量法

貨號(hào)：LZ-S01148

規(guī)格 : 100管/96樣

測試方法:微量法

產(chǎn)品分類：三羧酸循環(huán)系列

發(fā)貨地：上海

測定意義:

MDH （EC 1.1.1.37）廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，線粒體中MDH是TCA循環(huán)的關(guān)鍵酶之一，催化蘋果酸形成草酰乙酸；相反，胞漿中MDH催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要的中間產(chǎn)物， 連接多條重要的代謝途徑。因此，MDH在細(xì)胞多種生理活動(dòng)中扮演著重要的角色，包括線粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據(jù)不同的輔酶特異性，MDH分為NAD-依賴的MDH和NADP-依賴的MDH，細(xì)菌中通常只含有NAD-MDH，在真核細(xì)胞中，NAD-MDH分布于細(xì)胞質(zhì)和線粒體中。

測定原理:

MDHm催化NADH還原草酰乙酸生成蘋果酸，導(dǎo)致340nm處光吸收下降。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

試劑一：100mL×1 瓶，-20℃保存；

試劑二：20mL×1 瓶，-20℃保存；

試劑三：1.5mL×1 支，-20℃保存；

試劑四、液體 20 mL×1 瓶，在 4℃保存；

試劑五、粉劑×1 瓶，-20℃保存；

樣本測定的準(zhǔn)備：

組織、細(xì)菌或細(xì)胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離：

1、 稱取約 0.1g 組織或收集 500 萬細(xì)胞，加入 1mL 試劑一和 10uL 試劑三，用冰浴勻漿器或研缽勻漿。

2、 將勻漿液于 600g，4℃離心 5min。

3、 棄沉淀，將上清液移至另一離心管中，11000g，4℃離心 10min。

4、 上清液即胞漿提取物，可用于測定從線粒體泄漏的 MDH（此步可選做）。

5、 在步驟④的沉淀中加入 200uL 試劑二和 2uL 試劑三，超聲波破碎（冰浴，功率 20％或200W，超聲 3 秒，間隔 10 秒，重復(fù) 30 次），用于 MDHm 活性測定。

生化檢測試劑盒操作步驟：

一、?準(zhǔn)備工具和環(huán)境?：確保操作臺(tái)面干凈、整潔，這是進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn)的步。

?二、?仔細(xì)閱讀說明書?：這是使用試劑盒的基礎(chǔ)，說明書包含了所有必要的信息和操作指南。

三、樣本采集?：按照說明書的指導(dǎo)，正確采集樣本。不同類型的檢測可能需要不同類型的樣本，如血液、唾液或鼻涕等。杭州

?四、樣本混合?：將樣本與試劑小心混合，注意輕柔操作，避免產(chǎn)生泡沫，以確保檢測的準(zhǔn)確性。

?五、?等待反應(yīng)?：混合后，耐心等待試劑盒的反應(yīng)，這個(gè)時(shí)間可以用來進(jìn)行其他活動(dòng)，但不要著急，因?yàn)楹玫慕Y(jié)果值得等待。

六、結(jié)果判讀?：時(shí)間到后，仔細(xì)判讀結(jié)果。試劑盒通常會(huì)有明確的指示，告訴你如何根據(jù)顯示的線條或顏色來判斷結(jié)果。

注意事項(xiàng):

①加入試劑的順序應(yīng)一致,以所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。

公司正在出售的產(chǎn)品：

TGF beta 2 Propeptide 轉(zhuǎn)移生長因子–β2前體肽 0.5mgTGF beta 2 Propeptide 轉(zhuǎn)移生長因子–β2前體肽

CD300E Protein Human 重組人 CD300E / IREM-2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

Spike重組人 spike glycoprotein 蛋白 (aa 1-760, His 標(biāo)簽) Protein

PECAM1 Protein Human 重組人 CD31 / PECAM1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

PLK1重組人 PLK1 / PLK-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

小鼠凝血因子XIII B(F13B)ELISA試劑盒 ，英文名： F13B ELISA Kit

小鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA檢測試劑盒MouseapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 96T/48T

人肺炎衣原體(Cpn)抗體(IgG)試劑盒 Human Chlamydia pneumoniae(Cpn)aibody(IgG)ELISA Kit

RatLeptospiraIgG,LepIgGELISAKit大鼠鉤端螺旋體IgG(LepIgG)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

COLLAGENI蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試劑盒25次

MouseMyosin,MYSELISA試劑盒小鼠肌球蛋白(MYS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Spike重組人 spike glycoprotein 蛋白 (aa 1-760, His 標(biāo)簽) Protein

TGF beta 2 Propeptide 轉(zhuǎn)移生長因子–β2前體肽 0.5mgTGF beta 2 Propeptide 轉(zhuǎn)移生長因子–β2前體肽

PLK1重組人 PLK1 / PLK-1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CD300E Protein Human 重組人 CD300E / IREM-2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

PECAM1 Protein Human 重組人 CD31 / PECAM1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

線粒體蘋果酸脫氫酶（MDHm）試劑盒微量法小鼠凋亡抑制基因(Bcl-2)ELISA試劑盒

Human myeloperoxidase specificity of ai neuophil cytoplasmic aibody IgG (MPO-ANCA IgG)ELISA Kit 人髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)ELISA試劑盒

HumancoagulationfactorⅩⅢ,FⅩⅢELISAKit 人凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanArginase,ArgELISA試劑盒人精酸酶(Arg)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物源性食品大麥(barley)試劑盒20次

HumahyroidAibody,TAbELISAKit人甲狀腺抗體(TAb)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T