平板計數(shù)瓊脂(PCA)培養(yǎng)基
貨號:LZ-PYJ5273
英文名稱:Plate Count Agar
產(chǎn)品規(guī)格:250g
平板計數(shù)瓊脂(PCA)用于菌落總數(shù)測定。
配制方法:
稱取本品23.5克,加入1000mL蒸餾水中,加熱煮沸溶解,分裝,121℃高壓滅菌15分鐘備用。
成分(g/L)
胰蛋白胨..................5g
酵母浸膏粉..............2.5g
....................1g
瓊脂.....................15g
注意事項:
本品滅菌后應(yīng)在無菌環(huán)境下操作
本品出現(xiàn)結(jié)塊請勿使用
配制過程中的常見問題分析:
01 培養(yǎng)基顏色不正確
(1)含有酸堿指示劑的培養(yǎng)基,若顏色不正確,通常是由于pH不正確導(dǎo)致的,加熱過度、錯誤的滅菌方式等都會導(dǎo)致此項問題。
(2)加熱過度導(dǎo)致某些成分分解或糖焦化,如SC培養(yǎng)基(SC增菌液)加熱過度會變紅,含糖量高的培養(yǎng)基,加熱過度通常會出現(xiàn)顏色加深,呈焦糖色或棕褐色。
(3)某些成分變質(zhì),如血液久置易變黑,制成的平板顏色偏棕黑色。
02 培養(yǎng)基不凝固或凝固性差
(1)顆粒培養(yǎng)基稱量錯誤
(2)瓊脂分布不均勻
(3)培養(yǎng)基pH不正確
(4)培養(yǎng)基加熱過度
(5)瓊脂量不足
03 培養(yǎng)基產(chǎn)生沉淀
(1)某些培養(yǎng)基原本就含有不溶性沉淀,如TTB,MC培養(yǎng)基等,配方中含有大量不溶性碳酸鈣。
(2)滅菌前未充分溶解,若滅菌前溶解不充足,滅菌后就會出現(xiàn)大量沉淀。
(3)pH不正確,偏酸或偏堿都有可能使培養(yǎng)基中的部分金屬離子產(chǎn)生沉淀。
(4)水的純度不夠,天然水中含有較多的礦物鹽離子,若未除凈,則易與培養(yǎng)基中反應(yīng)生成沉淀。
(5)添加劑加入溫度不正確,卵黃、血液等對溫度敏感的添加成分,若加入時溫度過高或溫差過大,易出現(xiàn)凝塊。
(6)稱量錯誤。
(7)試劑加入順序不正確。
注意事項:
1)培養(yǎng)基盡量使用新鮮培養(yǎng)基,2~4h內(nèi)用完;
2)上海應(yīng)使用預(yù)還原培養(yǎng)基,預(yù)還原24~48h更好;
3)可采用預(yù)還原滅菌法制作的培養(yǎng)基(用前于培養(yǎng)基中加入還原劑,如L-半胱氨酸、維生素C等,盡可能使預(yù)還原劑處于還原狀態(tài));
4)液體培養(yǎng)基應(yīng)煮沸10min,以驅(qū)除溶解氧,并迅速冷卻,立即接種醫(yī)。學(xué)教育網(wǎng)搜集整理;
5)厭氧菌的培養(yǎng)基均應(yīng)營養(yǎng)豐富,并加有還原劑與生長刺激因子(血清、維生素K、氯化血紅素、聚山梨酯-80等)。
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